程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究中的成果

循环细胞( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检古生物学家”，已在转回性肺癌、癌和结胃癌之前用做结节病评价。小细胞心肌梗塞(Small celllung cancer，SCLC)组织古生物学家举例来说欠缺，且缺失有效的注意到异常患转回和预测结节病的生物；也。仅有年来深入深入研究CTCs在SCLC之前的临床运用进行时了探索性深入研究，挖掘出CTCs对SCLC的病因、分期，注意到异常患、转回，评量、结节病以及建立空无外科手术方案等不具备关键性意义，本文就CTCs在SCLC临床运用之前的深入研究令人满意一再综述。

一、SCLC症状CTCs的侦测方式

CTCs的侦测方式主要有流式细胞侦测技术开发计划( fluocytometry，FCM)、限制性一磷酸化链催化(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTC芯片(CTC-chip)技术开发计划和细胞膜滤过转化细胞技术开发计划(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其之前CellSearch系统因其半自动化的转换的平台，较高的特异性、敏感性和可重复性，视为最常运用的CTCs侦测方式。

早在2004年，Allard等率先运用CelISearch例侦测了99实有心肌梗塞（未列举SCLC实有数）症状的CTCs，随后Nagrath等转用CTC-chip例侦测了55实有心肌梗塞症状外周精气C TCs。2009年在此之后的深入研究多转用CeIISearch例侦测SCI．C症状外周精气CTCs，然而该方式由于对缺失血管壁不同之处的细胞就会注意到漏检意味著，且与免疫磁珠及抗体结合的CTCs无例行某些后续的侦测，临床运用受到局限于。

仅有年来，随着纳米科技的发展，核酸CTCs外层；也的特异性识别分f修饰的纳米材料结合微流控技术开发计划的CTCs侦测的平台的深入研究受到相当多关注，2013年，《自然》（Nature）杂志将CTCs纳米侦测选为最具创新性和转变成潜力的病因新方式，成果大放异彩。但就目前来看，原先的CTCs侦测方式各有利弊，未有深入研究证明哪种方式对SCLC的CTCs侦测越来越有优势。着眼未来，亟需开发计划特异性、敏感性越来越高的CTCs侦测技术开发计划，为SCLC的基础和临床深入研究造成突破。

二、CTCs在SCLC临床运用之前的深入研究现状

（一）CTCs除此以外与SCLC的病因、分期

仅有年来多项深入研究揭示CTCs除此以外高水平与SCLC的病因、分期有的关系关系0 2009年Tanaka等运用CeIISearch例侦测了1 50实有7.5ml外周精气CTCs，其之前心肌梗塞1 25实有、非恶性25实有，心肌梗塞症状包括116实有非小细胞心肌梗塞(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9实有SCLC。

深入研究仅有期SCLC症状CTCs感染性率为66.70-/0（6实有／9实有），明显较低NSCLC症状的CTCs感染性率(膀胱癌25.9%，鳞癌40.9%；膀胱癌对比SCLC，P

月底，Hou等运用CeIISearch例侦测了50实有初治的SCLC症状外周精气CTCs，包括20实有局限于期SCLC (limited disease，LD-SCLC)症状和30实有相当多期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)症状，曲率半径期ED-SCLC及LD-SCLC症状的之前位CTCs除此以外大致相同237和2个/7.5ml精气，7实有未掺入CTCs的症状均为LD-SCLC，假定CTCs除此以外高水平与SCLC分期相关。

相似的结论在2012年被冲绳人类学家Naito等证明，深入深入研究在51实有SCLC症状之前立用CeIISearch例侦测曲率半径期CTCs高水平，仅有期ED-SCLC,症状的之前位CTCs除此以外为9.5个f 7.5ml精气，而LD-SCLC仅为1个／7.51111精气，正因如此面假定ED-SCLC症状的CTCs高水平较低LD-SCLC症状。

（二）CTCs评量SCLC的及结节病

CTCs究竟可作为评量SCLC和结节病的有救同义f,匙深入深入研究们一直在探讨的疑虑。Houi等在2009年通过CellSearch例侦测了50实有SCLC症状(LD-SCLC20实有，ED-SCLC30实有)的CTCs，挖掘出CTCs>300个/7.5ml精气的症状及CTCs

曲率半径期CTCs>=50和

在该深入研究之前SCLC症状的结节病并不相同最大值设定8个/7.5ml精气，以此将症状分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年或多或再加运用CellSearch例侦测59实有SCLC症状在曲率半径期、1短时间段放射外科手术后及4短时间段放射外科手术结束后外固精气CTCs高水平，其之前ED-SCLC症状38实有，LD-SCLC症状2 1实有c曲率半径期有43实有症状(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml精气，CTCs>215个/7.5ml精气和CTCs

经过1短时间段放射外科手术后症状CTCs高水平有所增加，且1短时间段放射外科手术后CTCs

深入深入研究推断CTCs高水平是SCLC结节病的分立影响遗传物质，其之前1短时间段放射外科手术后CTCs高水平是SCLC和结节病最强的预测遗传物质。

2013年ASCO发表的ECOG1508深入研究之前，深入深入研究为了让在155实有ED-SCLC之前加入核酸外科手术，并对其之前123实有症状曲率半径期CTCs进行时侦测，仅有期核酸外科手术最终该线ED-SCLC症状的PFS和OS，但挖掘出曲率半径期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml精气的mPFS大致相同4.4和4.3个月底（P=0.07），OS大致相同10.7和7.2个月底(P=0.01)。深入深入研究认为虽然核酸外科手术没能进一步提高ED-SCLC症状的PFS和OS，但却挖掘出了CTCs意味著是SCLC症状的结节病；也。

已经有，Igawa等为了让运用OBP-401试验车侦测SCLC症状外周精气CTCso运用OBP-401试验车侦测肺癌和胃癌症状CTCs的相关深入研究已有前期报道。深入研究纳入30实有韧治的SCLC症状，29实有症状(96%)外周精气CTCs感染性。在曲率半径期，21实有症状CTCs

（三）CTCs注意到异常SCLC的患和转回

原先的深入研究声称通过侦测CTCs的注意到来注意到异常SCLC的患和转回不具备关键性的临床意义o Tanaka等深入研究挖掘出CTCs高水平‘j 125实有心肌梗塞症状（包括9实有SCLC症状）令人满意明显相关，特别是与所在位置转回的关系（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，作者认为CTCs可作为注意到异常心肌梗塞所在位置转回的生物标记物。Natio等深入研究挖掘出SCLC在曲率半径期、外科手术结束后及患后CTCs的感染性率大致相同68.6%、26.5%和67.6，提示SCLC患后外周学CTCs高水平下降，遭遇所在位置转回脏器的比率为0、1和>=2的症状其之前位CTCs除此以外大致相同2.0、7.5和21个/7.5ml精气,提示CTCs高水平与所在位置转回脏器的比率有关，所在位置转回越多，CTCs除此以外越高（p

三、CTCs在SCLC临床运用之前的探索方向

患和转回是随之而来症状外科手术败北和死亡的主要诱因，第一短时间挖掘出的患和转回并采敢不遗余力有效的外科手术控制措施可显著进一步提高症状生存环境率。然而，由于SCLC缺失很难注意到异常患和转回的生物；也，且原则上检查检查无例挖掘出微转回灶及微小残留溃疡，随之而来遭遇患和转回的SCLC症状不能第一短时间接受病因和外科手术。

临床之前部分LD-SCLC的症状结节病相异较大，提示有些局限于期的症状在病因时意味著已遭遇了检查不能挖掘出的微转回而视为潜在的相当多期症状。通过侦测外周精气CTCs的注意到及比率转变从而对SCLC症状体内状态进行时实时、动态地注意到异常和评价，第一短时间挖掘出的患、转回，将越来越进一步临床医生对外科手术及早的做到和外科手术策略的自由选择，但根本CTCs的比率或转变最大值为多再加时很难精确反映SCLC的患或转回尚不说明，需要越来越多的循证外科确凿证据一再支持。

CTCs在评量SCLC症状外科手术方面的运用尚处于探索阶段，外科手术每一次之前CTCs比率的转变与SCLC症状放射外科手术的相关性及其与SCLC症状放疗及早的自由选择等疑虑在未来需大量的临床深入研究。仅有5年，对CTCs究竟可作为SCLC症状结节病同义标的深入研究逐渐增多，但SCLC最佳的结节病CTCs并不相同最大值尚无定论，异议颇多。

其之前3项来自Hou、Naito、Hiltermann的深入研究将SCLC的结节病CTCs畀定最大值分别设定为50、8和2个／7.5ml精气，相异很大，这意味著与深入研究转用的统计学方式不尽相同以及入组样本量较再加有关。仅有来博洛尼亚人类学家Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC症状分开深入研究，对曲率半径期、l短时间段放射外科手术后CTCs以及外科手术前后CTCs的转变最大值分别设定结节病并不相同最大值，为未来的深入研究包括了新的思路。笔者所在的科研设计团队也正致力于我国SCLC症状结节病最佳CTCs并不相同最大值的深入研究，结果令人期许。

的空无外科手术是外科手术模式的发展方向。SCLC症状对放射外科手术类固醇的催化存在明显的个体相异，其主要诱因意味著与繁复的异质性、表型相异及多态性有关。所以，逐步更为关键性SCLC的线粒体学不同之处对付诸无论如何意义上的SCLC空无外科手术尤为关键性。仅有来我国人类学家王洁等深入研究人员通过运用单细胞遗传脱氧核糖核酸手段对症状单个CTC进行时正因如此线粒体、遗传物质线粒体脱氧核糖核酸。

在此项深入研究之前，谢晓亮任教发明的多重退火和环化循环的扩增技术开发计划(MAIBAC)，尝试付诸了对症状外周精气单个CTC的正因如此线粒体扩增和深度脱氧核糖核酸，在单个细胞高水平人造卫星正因如此线粒体遗传拷贝数个体差异(CNVs)和单核苷酸个体差异(SNVs)o单细胞高水平CTCs线粒体脱氧核糖核酸技术开发计划可第一短时间包括如耐药特异性等空无外科手术所需的关键性数据，同时也为未来SCLC核酸类固醇的开发计划包括技术开发计划支持。

SCLC组织古生物学家难以获取，限制了后续各项检查深入研究的筹划，而利用CTCs实现的SCLC循环细胞移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望解决这一棘手难题。已经有，Hodgkinson等为了让将6实有ED-SCLC症状lOml外周精气之前的CTCs提取后注射到免疫缺陷激素腹细胞膜，结果在4只激素躯体形成了CDXs，假定SCLC症状的CTCs不具备致瘤性。

同时运用CelISearch例侦测这6实有SCLC症状的CTCs，仅有期尝试形成CDXs的4实有症状的CTCs除此以外均>400个／7.5ml精气，而另外2实有未形成CDXs的症状其CTCs除此以外大致相同222和20个／7.5ml精气，提示SCLC的CTCs致瘤性与外周精气CTCs教量有关。正因如此面分析挖掘出相较于放射外科手术敏感性SCLC，放射外科手术抗性SCLC症状的CDXs倍增短时间越来越长、生长越来越迅速。对3实有CDXs给予顺铂和依托泊苷放射外科手术类固醇，其敏感性顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应症状的OS大致相同9.7.3.5.0.9个月底，提示对CDXs进行时灌注药敏试验车可以间接催化症状生存环境短时间。

该深入研究揭示部分SCLC的外周精气CTCs不具备干细胞特性，可进行时灌注培养出来、形成与原发高度相似的CDXs，为SCLC症状的灌注药敏试验车、耐药组态分析等一系列检查深入研究包括了发挥作用的组织，解决了SCLC症状古生物学家举例来说欠缺的疑虑。

结论

从现行的深入研究可以看出，虽然CTCs在SCLC之前的临床运用仍处于探索阶段，但前景广阔。目前，诸多转变成性深入研究正要进行时之前，无论如何随着深入研究的不断深入，CTCs有望视为SCLC的突破口，期许CTCs在SCLC的数据技术之前为我们造成观众们。

编辑： 露